Le 16 janvier 1930 est inaugurée la ligne Strasbourg-Ottrott, par Lingolsheim et Meistratzheim. Electrifiée dès l'origine, cette ligne se voit dotée d'un materiel des plus modernes et des plus performants.

Troisième ligne partant de l'Ancienne Gare, consacrant le vénérable bâtiment dans son rôle de lieu de rencontre privilégié de l'urbain et du rural.

Itinéraire de la ligne :

- Ancienne Gare

- Boulevard de Metz

- Boulevard de Nancy

- Boulevard de Lyon

- Route de Schirmeck

- Lingolsheim (km 7), après les sablières passage à la tension de 800 V

- Entzheim (km 10,5)

- Geispolsheim (km 12,8)

- Blaesheim (km 15,6)

- innenheim (km 18,7)

- Krautergersheim (km 20,9)

- Meistratzheim (km 24,4)

- Niedernai (km 26,4)

- Obernai Gare A.L. (km 28,7)

- Obernai Place du Marché (km 30)

- Saint Léonard (km 33,3)

- Ottrott (km 34,7).

L'ensemble du parcours fait 35 km, il s'effectue en 2 heures, et il voyait circuler 7 à 8 trams par jours dans les 2 sens.

Les horaires des tramways pour le gare de Innenheim (pour la direction et la provenance de Strasbourg) :

- Départs : 5 h 45, 6 h 45, 9 h 30, 13 h 10, 17 h 50.

- Retours : 6 h 30, 8 h 30, 13 h 10, 17 h 30, 19 h 00.

Par décision du Conseil General, et malgré une grande manifestation de protestation à Meistratzheim le 11 avril 1954, le tramway d'Ottrott effectue son dernier trajet le 31 mars 1955. Le trafic est alors transféré sur route à l'aide d'autobus.